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北京基因組所等首次精準解析結核分枝桿菌復合群甲基化圖譜

作者: 2015年12月31日 來源:互聯網 瀏覽量:
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結核病是全球最常見的傳染病之一,據WTO“2015年全球結核病年報”報告,2014年全球新增感染人數960萬,死亡150萬,新增耐多藥結核(MDR)病例48萬(其中我國新增結核感染病例93萬,居全球第三位),其目前仍是全球第

  結核病是全球最常見的傳染病之一,據WTO2015年全球結核病年報”報告,2014年全球新增感染人數960萬,死亡150萬,新增耐多藥結核(MDR)病例48萬(其中我國新增結核感染病例93萬,居全球第三位),其目前仍是全球第二大傳染病。結核分枝桿菌復合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)是引發結核病的元兇,其主要包含結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)、非洲分枝桿菌(Mycobacterium africanum)、牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis)和田鼠分枝桿菌(Mycobacterium microti)。MTBC成員在基因組序列上相似性超過99%,但是不同的譜系在毒力和宿主上有著較大的差異。DNA甲基化對于基因表達的時空特異性研究具有重要意義,因而成為表觀遺傳學的研究熱點。然而,自1998年第一篇結核分枝桿菌全基因組在Nature雜志上發表至今,其全基因組甲基化圖譜并未揭曉。

  為了全景式解析MTBC的基因組甲基化圖譜,中國科學院北京基因組研究所基因組科學與信息重點實驗室陳非研究組和首都醫科大學附屬北京胸科醫院國家結核病臨床實驗室黃海榮研究組合作,選取了分屬不同譜系的12MTBC(包括牛分枝桿菌、卡介苗、田鼠分枝桿菌、非洲分枝桿菌、6株臨床結核分枝桿菌,以及結核分枝桿菌標準株H37RvH37Ra1株),利用Pacbio三代單分子實時測序技術(Single-Molecule Real-Time, SMRT)對它們的全基因甲基化組進行了全方位的解析。該研究共鑒定到了3MTBC中特有的m6A甲基化基序及相對應的甲基轉移酶基因——mamAhsdM mamB,并通過實驗驗證了上述酶的活力。通過比較基因組學的研究,該研究還發現了導致甲基化酶失活的基因突變或缺失。

  上述研究團隊還通過深入挖掘Pacbio三代測序所獲得的數據,借助于對單位點甲基化比例的計算,得到了MTBC的精準甲基化圖譜,揭示了細菌中也存在大量的部分甲基化未甲基化位點,說明細菌的基因組DNA甲基化也可能如真核生物細胞DNA甲基化一樣具有復雜的調控機制。經過進一步的深入探究還發現,大部分未甲基化位點與轉錄因子結合區域重合,暗示轉錄因子的存在可能保護這些區域免于甲基化。

  該項研究不但揭示了MTBC的全基因組精準甲基化圖譜,而且提出了在MTBCDNA甲基化修飾可能行使表觀調控作用的假說,為研究結核病病原菌的表觀表型特征提供了別樣的解析視角。此外,該研究還表明Pacbio三代測序平臺在精準表征核酸表觀遺傳修飾上具有巨大潛力,為深入探究核酸表觀遺傳修飾的精準調控機制提供了新的工具和思路。

  該研究成果于201512月在線發表于國際期刊Nuclear Acid Research。該研究得到中國科學院百人計劃、中國科學院重點部署項目、重大傳染病防治重大專項等資助。

12株MTBC基因組信息和DNA甲基化信息圖

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標簽:MTBC 基因組甲基化圖譜

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