如何解決液相色譜儀中出峰異常問(wèn)題

    液相色譜儀系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。然而在檢測(cè)過(guò)程中時(shí)有發(fā)生出峰異常的問(wèn)題，那么遇到這類(lèi)問(wèn)題時(shí)該如何解決呢？

問(wèn)題一：出峰不佳,峰分叉。      

原因：(1) 色譜柱被污染; (2) 柱頭填料塌陷。      

解決方法：處理對(duì)于第一種情況, 先用純水反向沖洗柱子, 然后換成甲醇沖洗, 接著用甲醇、異丙醇)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定) , 再換成甲醇沖洗, 然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30 分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對(duì)于第二種情況,擰開(kāi)柱頭,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料) ,裝入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊, 再填平, 滴甲醇, 再壓緊反復(fù)幾次, 直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈, 擦凈柱外壁的填料, 擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30 分鐘以上。   

問(wèn)題二：峰面積重復(fù)性不佳。      

原因：(1) 進(jìn)樣閥漏液; (2) 加樣針不到位。     

解決方法：處理對(duì)于第一種情況更換進(jìn)樣閥墊圈; 對(duì)于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD 狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJ EC T 狀態(tài),以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中, 液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要, 如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中, 儲(chǔ)液器內(nèi)的溶液如長(zhǎng)時(shí)間未用應(yīng)清洗儲(chǔ)液器并更換溶液, 每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無(wú)機(jī)鹽析出或沉積; 樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì), 完全溶解, 盡量減少對(duì)色譜柱的污染, 以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命, 同時(shí)避免注射過(guò)濃的樣品溶液, 以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞; 色譜柱作好標(biāo)記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。

問(wèn)題三：液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么？

原因：1.篩板堵塞或柱失效   2.存在干擾峰

解決辦法：對(duì)于第一種情況可以反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子；對(duì)于第一種情況解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子。