高效液相色譜儀適宜于分離、分析高沸點、熱穩定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質，因而廣泛為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中針對這種精密而又運用廣泛的科學儀器，昨天我們講解了其常見的柱壓問題及解決方法，今天我們來聊一聊基線。HPLC常見的基線問題主要有基線漂移以及基線噪音。
 

　　基線漂移
 

　　線漂移基線漂移是色譜工作者普遍遇到的問題。一般說來，機器剛起動時，基線容易漂移，大概要30min的平衡時間，如果用了緩沖溶液、緩沖鹽，或者在低波長下(220nm)平衡時間相對會比較長，仍然發現基線漂移，原因可能有以下幾種：
 

　　1、柱溫波動
 

　　控制好柱子和流動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調對著柱溫箱。
 

　　2、流通池被污染或有氣體
 

　　用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池(盡量斷開柱子)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
 

　　3、紫外燈能量不足
 

　　更換新的紫外燈
 

　　4、流動相污染、變質或由低品質溶劑配成。 檢查流動相的組成，使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑。
 

　　基線噪音
 

　　對于紫外檢測器, 氘燈光源打開后要預熱30 min以上, 基線才能穩定。噪聲是指與被測物無關的檢測器輸出信號的隨機擾動變化, 分短期噪聲和長期噪聲兩種。
 

　　基線噪音(規則的)
 

　　產生基線噪音的原因有：在流動相、檢測器或泵中有空氣;漏液;流動相混合不完全;溫度影響(柱溫過高,檢測器未加熱);在同一條線上有其他電子設備;泵振動。
 

　　了避免基線噪音,在正式進樣之前,需要對流動相脫氣;沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣;檢查管路接頭是否松動;泵是否漏液;是否有鹽析出和不正常的噪音,如有必要,更換泵密封;用手搖動使溶劑混合均勻或使用低粘度的溶劑減少差異或加上熱交換器;有其他電子設備時斷開LC、檢測器和記錄儀,檢查干擾是否來自于外部,加以更正;泵振動時在系統中加入脈沖阻尼器。
 

　　基線噪音(不規則的)
 

　　(1) 漏液：檢查接頭是否松動,泵是否漏液,是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要,更換密封,檢查流通池是否漏液。
 

　　(2) 流動相污染、變質或由低質溶劑配成：檢查流動相的組成。
 

　　(3) 流動相各溶劑不相溶：選擇互溶的流動相。
 

　　(4) 檢測器/記錄儀電子元件的問題：斷開檢測器和記錄儀的電源,檢查并更正。
 

　　(5) 系統內有氣泡：用強極性溶液清洗系統;檢測器內有氣泡,清洗檢測器,在檢測器后面安裝背景壓力調節器。
 

　　(6) 流通池污染(即使是極少的污染物也會產生噪音) :用硝酸清洗流通池;
 

　　(7) 檢測器燈能量時不足更換燈;
 

　　(8) 色譜柱填料流失或阻塞:更換色譜柱。
 

　　(9) 流動相混合不均勻或混合器工作不正常:維修或更換混合器,在流動相不走梯度時,不建議使用泵的混合裝置。