氟蟲腈是一種廣譜殺蟲劑，能有效殺滅跳蚤、螨蟲等有害生物，被世界衛(wèi)生組織列為“對人類有中度毒性”的化學(xué)品。雞蛋是人們比較喜愛的食品，然而近兩年來不斷有報(bào)道雞蛋中檢出氟蟲腈，尤其是2017年荷蘭的“毒雞蛋”事件，引起了各國對雞蛋中氟蟲腈及其代謝物含量的重視，之后包括荷蘭、比利時(shí)、德國、英國、法國等在內(nèi)的近20個(gè)國家和地區(qū)都相繼爆發(fā)出各種安全事件。歐盟、美國和中國香港對鮮蛋中氟蟲腈的限量要求分別為0.005、0.03、0.02mg/kg。國際食品法典委員會(huì)對蛋類中氟蟲腈的限量要求為0.02mg/kg，但對氟蟲腈代謝物的限量無明確規(guī)定。我國自2009年10月1日起禁用氟蟲腈，并在GB2763-2016中明確規(guī)定了氟蟲腈在谷物、蔬菜中的最大殘留限量，但對于蛋類中的最大殘留限量未做規(guī)定。
    本研究采用快速溶劑萃取儀（APLE）提取，在線固相萃取凈化，GC-MS法測定雞蛋中氟蟲腈及其3種代謝物（氟甲腈，氟蟲腈亞砜和氟蟲腈砜）。該方法集提取和凈化一步完成，大大縮短了樣品前處理消耗的時(shí)間，有機(jī)溶劑用量少，操作簡單，分析快速，適用于雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留量的日常檢測工作。
2 材料與方法
2.1 儀器與試劑
儀器：APLE-3500 快速溶劑萃取儀（北京吉天儀器有限公司――以下簡稱：吉天儀器），配有11mL萃取池；氮吹濃縮儀；冷凍干燥機(jī)FD-1A-50（北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；GCMS-QP2010SE 氣相色譜質(zhì)譜儀（日本島津）。
試劑：乙酸乙酯中銳勁特（氟蟲腈）、丙酮中氟蟲腈亞砜、丙酮中氟蟲腈砜、丙酮中氟甲腈、正己烷中環(huán)氧七氯，購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所，濃度均為100μg/mL；分散固相萃取純化管（dSPE：150mg MgSO4，50mg PSA，50mg C18，7.5mg GCB, 2mL）CNW○R；乙腈（色譜純）；丙酮（色譜純）；硅藻土（北京吉天儀器有限公司）。
樣品：市售生雞蛋去殼攪碎后冷凍干燥24h，粉碎機(jī)粉碎密封冷凍儲存。
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
混標(biāo)儲備液的配制：準(zhǔn)確移取100μg/mL的4種目標(biāo)物的母液各0.5mL至10mL的容量瓶，用乙腈定容至刻度，配成濃度5μg/mL的混標(biāo)儲備液，臨用時(shí)稀釋。
內(nèi)標(biāo)溶液的配制：準(zhǔn)確移取100μg/mL的環(huán)氧七氯母液0.5mL至25mL的容量瓶，用丙酮定容至刻度，配成濃度2μg/mL的內(nèi)標(biāo)儲備溶液。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：準(zhǔn)確移取5.00μg/mL的混標(biāo)儲備溶液，用不含目標(biāo)物的樣品基質(zhì)溶液稀釋配制成0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.00μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
2.2.2 氣相色譜-質(zhì)譜條件
氣相條件：色譜柱Rtx○R-5Sil MS，0.25mm*0.25μm*30m；進(jìn)樣口溫度260℃，不分流進(jìn)樣；柱溫60℃，保持1min，以25℃/min升至125℃，以10℃/min升至300℃保持10min；柱流速1.0mL/min；進(jìn)樣量1.0μL。
質(zhì)譜條件：四級桿溫度150℃；離子源溫度230℃；接口溫度300℃；掃描模式SIM；溶劑延遲時(shí)間5min。4種分析物及內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)見表1，分離情況見圖1。
2.2.3 樣品前處理
    準(zhǔn)確稱取粉碎后的雞蛋樣品1.0000g（精確至0.0001），硅藻土1.0000g研磨均勻后裝入11mL萃取池，池底裝有2.0g硅藻土和6支dSPE純化管中的吸附劑（300mgPSA、300mgC18 、45mgGCB、0.9gMgSO4）混合均一的體系，作為在線凈化吸附劑，密封萃取池，置于APLE-3500進(jìn)行萃取，萃取條件見表2。萃取液經(jīng)氮吹濃縮近干，加入100μL內(nèi)標(biāo)溶液，用乙腈定容至0.5mL，過0.45μm有機(jī)濾膜，待GC-MS分析。
3 結(jié)果與討論
3.1 樣品前處理?xiàng)l件的選擇
    雞蛋樣品含有大量的蛋白質(zhì)和脂肪，乙腈的極性強(qiáng)，具有沉淀蛋白質(zhì)的作用且能夠提取出較少的脂肪，萃取液清澈，有效降低基質(zhì)干擾效應(yīng)。另一方面乙腈提取效率高，原因可能是氟蟲腈及其代謝物與乙腈含有相同的-CN基團(tuán)，根據(jù)相似相容的原理，容易被乙腈萃取出來。因此選用乙腈作為萃取溶劑。混合吸附劑PSA和C18能夠有效去除脂肪、碳水化合物等雜質(zhì)，GCB能夠有效吸附色素。
    快速溶劑萃取過程中循環(huán)次數(shù)直接決定萃取所需有機(jī)溶劑的體積及整個(gè)萃取流程所消耗的時(shí)間，從而影響萃取效率。APLE-3500最多可設(shè)定三次循環(huán)，通過空白加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，采用APLE-3500特有的序列模式將三次循環(huán)的收集液分別收集到三個(gè)樣品瓶中，考察每次循環(huán)中目標(biāo)物的含量，從而決定萃取過程選用的萃取次數(shù)。三次循環(huán)中目標(biāo)物的百分含量見表3。由表3的考察結(jié)果可知，通過兩次循環(huán)萃取目標(biāo)物已完全萃取出來，第三次循環(huán)萃取液中幾乎不含有目標(biāo)物，因此循環(huán)次數(shù)選用2次。
3.2 實(shí)際樣品的測定
    采用所建立的方法對來自不同區(qū)域的6批次雞蛋樣品進(jìn)行檢測，其中5批次樣品沒有檢出氟蟲腈及其代謝物，1批次樣品檢出氟蟲腈，含量為0.0097mg/kg，低于國家標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2016中規(guī)定的其他食品中最大殘留限量0.02mg/kg。
    詳細(xì)方法請參照2019年1期《分析儀器》雜志 《基于快速溶劑萃取的在線固相萃取-氣質(zhì)法測定雞蛋中的氟蟲腈及其代謝物》。